2019年7月3日,《国务院办公厅关于加强非洲猪瘟防控工作的意见》发布。文件指出“规范生猪产地检疫管理”“加强生猪屠宰监管-落实屠宰厂(场)自检制度。严格执行生猪定点屠宰制度。督促指导生猪屠宰厂(场)落实各项防控措施,配齐非洲猪瘟检测仪器设备,按照批批检、全覆盖原则,全面开展非洲猪瘟检测,切实做好疫情排查和。建立生猪屠宰厂(场)暂存产品抽检制度,强化溯源追踪,严格处置风险隐患”等,不难看出除兽医实验室,更多的生猪屠宰厂也将开展非洲猪瘟的检测工作。
非洲猪瘟(Africann Swine Fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)感染引起的家猪和野猪的一种急性、热性、高度接触性传染病。是目前已知的*一种虫媒传播的DNA 病毒,病毒可通过软蜱传播,野猪和家猪易感,可通过猪和猪之间的接触水平传播。临床症状与猪瘟极其相似, 以高热、呼吸困难、全身出血和神经症状为主要特征。本病传播快、致死率高,对养猪业危害巨大。目前全球尚无有效的预防疫苗,也没有任何药物可以治疗,防止疫情扩大的有效措施就是捕杀。为防止疫病的传播,需要实施严格的卫生和生物安全控制措施,而这就依赖于ASFV的快速、可靠的早期诊断。
ASF/ASFV
PCR/qPCR
目前而言,适用的诊断技术包括检测ASFV特异性抗原、DNA或抗体,分析疫病感染期和所获取的检测信息是控制疫情的重要保障。由于感染动物所处的感染期不同,因此控制根除疫情需要同时检测病毒和抗体以确保准确性。
关于检测ASFV的技术,OIE(世界动物卫生组织)推荐的方法主要有PCR(应用聚合酶链式反应)、实时荧光定量PCR、ELISA(酶联免疫吸附试验)等。PCR为分子生物学检测方法,ELISA为血清学检测方法,都是目前非常成熟的技术,普遍用于检测病毒和抗体。
ELISA利用抗原抗体进行免疫反应的定性和定量检测,应用于血清抗体的检测,适用于大批量样品的检测,但抗体只有在病毒感染至一定时期后才会出现,敏感性较低,因此ELISA等抗体检测方法存在一定的局限性和滞后性。
PCR是目前实验室ASFV检测*常用的方法,在ASFV的早期检测中具有重要作用。PCR已*应用于猪样本(血液、器官等)和蜱中ASFV基因组的检测。病毒DNA片段通过PCR扩增基因获得足以检测的量,在数小时内PCR即可快速成ASF的检测。相比于ELISA和直接荧光抗体测试(FAT) ,PCR具有更高的敏感性和特异性,可以检测出极低含量的ASFV,在猪感染ASFV早期即可快速检测出病毒核酸。
实时荧光定量PCR比常规PCR具有更高的敏感性和特异性,可同时快速检测大批量样品,更加敏感、准确。OlE在《陆生动物诊断试验和疫苗手册》(2016 年)中推荐使用的常规和实时荧光PCR得到了长期的充分验证,是常规诊断的重要工具。
非洲猪瘟检测解决方案之一:
1.样品采集:
口腔液\全血\血清\病料组织;
2.样品制备:高纯度核酸提取和纯化
核酸提取仪+核酸提取试剂盒,以获得高纯度的病毒DNA,对接qPCR检测;
3.快速准确检测:配制、DNA扩增等
qPCR仪+非洲猪瘟病毒qPCR检测试剂,快速准确的检测出ASFV诊断结果。
MACQUE核酸提取仪
MQ-Gene1000
采用磁珠法提取、纯化样本核酸,可兼容多种样本类型。
单次样本处理数量可达96份,亦可执行单一样本,不浪费耗材。
配套PCR体系构建ASFV检测解决方案
综上, 目前可用的诊断技术,PCR是*广泛应用的病毒学诊断技术,可灵敏、快速的实现ASFV的检测,对于控制和根除疫情而言极为重要。同时我们也深信,随着免疫学与分子生物学技术的不断发展,ASFV的实验室检测方法必将不断完善,为我国开展ASF的监测与综合防控提供进一步的技术支持。
秉承“至臻至诚、精益求精”的精神,我们为成为*的仪器设备综合服务商而不懈努力。
——马奎尔实验室
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"马奎尔实验室/MACQUE LABORATORY"是朴泰实验仪器(上海)有限责任公司旗下品牌,自公司设立以来,我们始终将技术创新、产品创新作为公司发展战略原点,以满足客户需求为,根据不同应用场景的差异化需要,提供*化、系统化、自动化的液体处理整体解决方案。现有产品包括,全自动液体处理工作站、核酸提取设备及配套试剂、移液器及生物医药检验常用设备等,同时提供非标仪器设备的定制服务。目前已覆盖临床诊断、科研学术、法医疾控、食品检测与农业等多个领域。